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蔗糖磷酸合成酶（SPS）檢測(cè)試劑盒（可見分光光度法50T/24S）
| 貨號(hào) | SH0302 | 售價(jià)（元） | 900 |
| 規(guī)格 | 50T/24S | CAS號(hào) |
- 產(chǎn)品簡(jiǎn)介
- 相關(guān)產(chǎn)品
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貨號(hào) |
名稱 |
規(guī)格 |
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SH0302 |
蔗糖磷酸合成酶（SPS）檢測(cè)試劑盒（可見分光光度法50T/24S） |
50管/24樣 |
測(cè)定意義：
蔗糖不僅是重要的光合產(chǎn)物，也是植物體內(nèi)運(yùn)輸?shù)闹饕镔|(zhì)，還是碳水化合物的貯存形式之一。SPS（EC 2.4.1.14）以果糖-6-磷酸為受體，形成的蔗糖磷酸在蔗糖磷酸酶的作用下形成蔗糖。一般把蔗糖磷酸酯合成酶-蔗糖磷酸酶系統(tǒng)看作是蔗糖合成的主要途徑。
測(cè)定原理：
蔗糖磷酸合成酶催化果糖-6-磷酸形成蔗糖磷酸，蔗糖磷酸與間苯二酚反應(yīng)可呈現(xiàn)顏色變化，在480nm下有特征吸收峰，酶活力大小與顏色的深淺成正比。
組成：
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產(chǎn)品名稱 |
SH0302-50T/24S |
Storage |
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提取液：液體 |
60ml |
4℃ |
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試劑一：液體 |
4ml |
-20℃ |
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試劑二：1000μg/ml蔗糖溶液 |
10ml |
4℃ |
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試劑三：液體 |
3ml |
-20℃ |
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試劑四：液體 |
40ml |
4℃ |
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試劑五：液體 |
12ml |
4℃避光 |
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說明書 |
一份 |
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自備儀器和用品：
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、移液器、1ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水
樣品測(cè)定的準(zhǔn)備：
按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測(cè)。
測(cè)定步驟：
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試劑名稱（μl） |
測(cè)定管 |
對(duì)照管 |
標(biāo)準(zhǔn)管 |
空白管 |
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樣本 |
30 |
30 |
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蒸餾水 |
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150 |
150 |
180 |
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試劑二 |
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30 |
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試劑一 |
150 |
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混勻，25℃準(zhǔn)確水浴10min
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試劑三 |
50 |
50 |
50 |
50 |
沸水浴中煮沸10min左右（蓋緊，以防止水分散失），冷卻
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試劑四 |
700 |
700 |
700 |
700 |
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試劑五 |
200 |
200 |
200 |
200 |
混勻，沸水浴30min，冷卻后， 480nm下測(cè)定各管吸光值。標(biāo)準(zhǔn)管和空白管只要做一管。每個(gè)測(cè)定管需要設(shè)一個(gè)對(duì)照管。
SPS活力單位的計(jì)算:
1、按照蛋白濃度計(jì)算
單位定義：每mg組織蛋白每分鐘催化產(chǎn)生1μg 蔗糖定義為一個(gè)酶活力單位。
SPS活性(μg /min/mg prot)= C標(biāo)準(zhǔn)管×V1×（A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷(V1×Cpr)÷T=100×（A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷Cpr
2、按照樣本鮮重計(jì)算
單位定義：每g組織每分鐘催化產(chǎn)生1μg 蔗糖定義為一個(gè)酶活力單位。
SPS活性(μg /min /g鮮重) = C標(biāo)準(zhǔn)管×V1×（A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷(W×V1÷V2)÷T=100×（A測(cè)定管-A對(duì)照管)÷（A標(biāo)準(zhǔn)管-A空白管)÷W
C標(biāo)準(zhǔn)管：標(biāo)準(zhǔn)管濃度，1000μg/ml；V1：加入反應(yīng)體系中樣本體積，0.03ml； V2：加入提取液體積，1ml；Cpr：樣本蛋白質(zhì)濃度，mg/ml；W：樣本鮮重，g；T ：反應(yīng)時(shí)間：10min。